Antimicrobial activity of Er, Cr: YSGG and Ultrasonic on E. faecalisbiofilm in the mesial root canal systems of lower molars / Atividade antimicrobiana de Er, Cr: YSGG e Ultrassônico no biofilme de E. faecalis nos sistemas de canais radiculares mesiais de molares inferiores

The internal topography of the root canal is complex, especially for the permanent molar's mesial root. In response to such issues, improved irrigation techniques have been created, which use laser pulses to agitate fluids and improve microbial deposit removal. Objective: To assess the effectiveness of the Er,Cr:YSGG laser with a wavelength of 2,780 nm via photon-induced photoacoustic streaming (PIPS) protocol which agitated of 2% chlorohexidine (CHX) in removing mature Enterococcus faecalis (E. faecalis) biofilm in root canal systems of lower molars. Material and Methods: The mesial roots of lower first and second molars were separated and inoculated with E. faecalis bacterial suspension for 30 days. The roots were irrigated with CHX, some of them were agitated with a passive ultrasonic device (PUI), while the other roots were agitated by an Er,Cr:YSGG laser in PIPS at 60 µs/pulse, 5 Hz, (0.25, 0.5, 0.75, and 1) W. An atomic force microscope (AFM) was used as a new method to get the results in the isthmus area; the obtained results from each group were compared with each other. Results: Based on the AFM and SEM analyses, laser and ultrasonic activation groups showed higher antimicrobial efficacy than the conventional syringe irrigation group (P<0.05). Conclusion: Based on the investigation's findings, the activation of 2% CHX solution by Er,Cr:YSGG laser in PIPS and PUI offers better mature bacterial biofilm removal in the mesial root of lower human molars than the same irrigant with the SI technique (AU)

A topografia interna do canal radicular é complexa, especialmente para a raiz mesial do molar permanente. Em resposta a esses problemas, foram criadas técnicas aprimoradas de irrigação, que utilizam pulsos de laser para agitar fluidos e melhorar a remoção de depósitos microbianos. Objetivo: Avaliar a eficácia do laser Er,Cr:YSGG com comprimento de onda de 2.780 nm via protocolo de streaming fotoacústico induzido por fótons (PIPS) que agitou clorohexidina a 2% (CHX) na remoção de Enterococcus faecalis maduro (E. faecalis) biofilme em sistemas de canais radiculares de molares inferiores. Material e Métodos: As raízes mesiais de 28 primeiros e segundos molares inferiores foram separadas e inoculadas com suspensão bacteriana de E. faecalis por 30 dias. As raízes foram irrigadas com CHX, sendo algumas delas agitadas com aparelho ultrassônico passivo (PUI), enquanto as demais raízes foram agitadas com laser Er,Cr:YSGG em PIPS a 60 µs/pulso, 5 Hz (0,25, 0,5, 0,75 e 1) W. Um microscópio de força atômica (AFM) foi utilizado como um novo método para obter os resultados na área do istmo; os resultados obtidos de cada grupo foram comparados entre si. Resultados: Com base nas análises de AFM e SEM, os grupos de ativação por laser e ultrassom apresentaram maior eficácia antimicrobiana do que o grupo de irrigação com seringa convencional (P<0.05). Conclusão: Com base nos achados da investigação, a ativação da solução de CHX a 2% pelo laser Er,Cr:YSGG em PIPS a (60 µs/pulso, 5 Hz, 0,75 W) oferece melhor remoção de biofilme (AU)

Herramientas de corte para optimizar parámetros de clasificación de especies maderables con redes neuronales convolucionales / Cutting tools to optimize classification parameters of timber species with convolutional neural networks

Introducción: La gran diversidad de especies maderables tropicales demanda el desarrollo de nuevas tecnologías de identificación con base en sus patrones o características anatómicas. La aplicación de redes neuronales convolucionales (CNN) para el reconocimiento de especies maderables tropicales se ha incrementado en los últimos años por sus resultados prometedores. Objetivo: Evaluamos la calidad de las imágenes macroscópicas con tres herramientas de corte para mejorar la visualización y distinción de las características anatómicas en el entrenamiento del modelo CNN. Métodos: Recolectamos las muestras entre el 2020 y 2021 en áreas de explotación forestal y aserraderos de Selva Central, Perú. Luego, las dimensionamos y, previo a la identificación botánica y anatómica, las cortamos en secciones transversales. Generamos una base de datos de imágenes macroscópicas de la sección transversal de la madera, a través del corte, con tres herramientas para ver su rendimiento en el laboratorio, campo y puesto de control. Resultados: Usamos tres herramientas de corte para obtener una alta calidad de imágenes transversales de la madera; obtuvimos 3 750 imágenes macroscópicas con un microscopio portátil que corresponden a 25 especies maderables. El cuchillo ''Tramontina'' es duradero, pero pierde el filo con facilidad y se necesita una herramienta para afilar, el cúter retráctil ''Pretul'' es adecuado para madera suave y dura en muestras pequeñas de laboratorio; el cuchillo ''Ubermann'' es apropiado para el campo, laboratorio y puesto de control, porque tiene una envoltura duradera y láminas intercambiables en caso de pérdida de filo. Conclusiones: La calidad de las imágenes es decisiva en la clasificación de especies maderables, porque permite una mejor visualización y distinción de las características anatómicas en el entrenamiento con los modelos de red neuronal convolucional EfficientNet B0 y Custom Vision, lo cual se evidenció en las métricas de precisión.

Introduction: The great diversity of tropical timber species demands the development of new technologies capable of identifying them based on their patterns or anatomical characteristics. The application of convolutional neural networks (CNN) for the recognition of tropical timber species has increased in recent years due to the promising results of CNNs. Objective: To evaluate the quality of macroscopic images with three cutting tools to improve the visualization and distinction of anatomical features in the CNN model training. Methods: Samples were collected from 2020 to 2021 in areas of logging and sawmills in the Central Jungle, Peru. They were later sized and, after botanical and anatomical identification, cut in cross sections. A database of macroscopic images of the cross-section of wood was generated through cutting with three different tools and observing its performance in the laboratory, field, and checkpoint. Results: Using three cutting tools, we obtained high quality images of the cross section of wood; 3 750 macroscopic images were obtained with a portable microscope and correspond to 25 timber species. We found the ''Tramontina'' knife to be durable, however, it loses its edge easily and requires a sharpening tool, the ''Pretul'' retractable cutter is suitable for cutting soft and hard wood in small laboratory samples and finally the ''Ubermann'' knife is suitable for use in the field, laboratory, and checkpoint, because it has a durable sheath and interchangeable blades in case of dullness. Conclusion: The quality of the images is decisive in the classification of timber species, because it allows a better visualization and distinction of the anatomical characteristics in training with the EfficientNet B0 and Custom Vision convolutional neural network models, which was evidenced in the precision metrics.

Effect of Clomiphene Citrate on the Ultrastructure of Testis in Albino Rats

SUMMARY: The aim of the present work was to study the closer effect of clomiphene citrate on the ultrastructure of the testis of adult albino rats to provide a basis for optimizing this drug in the treatment of male infertility. The testes were removed from both groups under anesthesia and then prepared for examination by light using hematoxylin and eosin stains and a transmission electron microscope. Semithin sections were cut into 1 µm thick sections, stained with toluidine blue, and examined by light microscopy for a survey. The desired areas were placed in the center, and other areas were trimmed. Primary spermatocytes showed marked nuclear changes (pyknosis), and their nuclear membranes were ill-defined and disrupted. The cytoplasm showed widespread degeneration of mitochondria and lysosomes and focal degeneration of the rough endoplasmic reticulum compared with the control group. The spermatids were pale, and the two phases of spermatogenesis were distinctly identifiable in the control group but were confused in the treated group. Some spermatids had interrupted nuclear membranes, also containing degenerated mitochondria, focal fragmentation of rough endoplasmic reticulum, and free ribosomes. Spermatozoa in the treated group appeared deformed compared to the control, where they had deformed head caps. Leydig cells of the treated group have an irregularly shaped nucleus, with focal chromatin aggregation and peripheral chromatin condensation on the inner surface of the nuclear membrane. The observations of the present work indicate a possible causal relationship between testicular affection and ingestion of clomiphene citrate, which can be avoided by close medical observations using ultrasonography, semen analysis, or testicular biopsy to detect early malignant changes. Furthermore, the drug should not be used for more than three to six cycles and should be stopped for at least three cycles before reuse. When clomiphene citrate is ineffective in the treatment of male infertility, human menopausal gonadotropin (hMG) administration is typically selected. However, high-dose hMG therapy is associated with a variety of adverse effects. In this work, we report the success of a modified clomiphene citrate regimen in increasing sperm count without any hazards to the testicular tissue.

El objetivo del trabajo fue estudiar el efecto del citrato de clomifeno sobre la estructura de los testículos de la rata albina adulta, con la finalidad de determinar la mejor manera de utilizar este fármaco en el tratamiento de la infertilidad masculina. Los testículos se extrajeron bajo anestesia y para su análisis a través de microscopio de luz se tiñeron con HE. Además, las muestras fueron preparadas para su examen con microscopía electrónica de transmisión. Por otra parte, se cortaron secciones semifinas de 1 µm de espesor, se tiñeron con azul de toluidina y se examinaron mediante microscopía óptica. Los espermatocitos primarios mostraron cambios nucleares marcados (picnosis) y sus membranas nucleares estaban mal definidas y alteradas. En el grupo experimental las células presentaban el citoplasma con degeneración generalizada de las mitocondrias y de los lisosomas y una degeneración focal del retículo endoplásmico rugoso en comparación con el grupo control. Las espermátidas estaban pálidas y las dos fases de la espermatogénesis eran claramente identificables en el grupo control, pero se confundían en el grupo tratado. Algunas espermátidas tenían membranas nucleares interrumpidas, y también contenían mitocondrias degeneradas, fragmentación focal del retículo endoplásmico rugoso y ribosomas libres. Los espermatozoides del grupo tratado se presentaban deformados en comparación con el control. Las células de Leydig del grupo tratado presentaban un núcleo de forma irregular, con agregación focal de cromatina y condensación de cromatina periférica en la superficie interna de la membrana nuclear. Las observaciones del presente trabajo indican una posible relación causal entre la afección testicular y la ingestión de citrato de clomifeno, que puede evitarse mediante observaciones médicas minuciosas a través de ecografía, análisis de semen o biopsia testicular para detectar cambios malignos tempranos. Además, el medicamento no debiera ser usado durante más de tres a seis ciclos y debe suspenderse durante al menos tres ciclos antes de volver a usarlo. Cuando el citrato de clomifeno es ineficaz en el tratamiento de la infertilidad masculina, normalmente se selecciona la administración de gonadotropina menopáusica humana (hMG). Sin embargo, la terapia con hMG en dosis altas se asocia con una variedad de efectos adversos. En este trabajo, informamos el éxito de un régimen modificado con citrato de clomifeno para aumentar el recuento de espermatozoides sin riesgo para el tejido testicular.

Light Microscopic, Ultrastructure Analysis and Functional Morphology of Cornu aspersum Spermatozoa Contained in the Frozen Hermaphroditic Duct / Análisis de Microscopía de Luz, Ultraestructura y Morfología Funcional de Espermatozoides de Cornu aspersum Contenidos en el Conducto Hermafrodita Congelado

SUMMARY: In this study we describe the functional morphology of Cornu aspersum (Helix aspersa), spermatozoa using light, scanning (SEM) and transmission electron (TEM) microscopies. The studies were performed with sperm located in the frozen hermaphroditic duct. Our results showed that the head presents an elongated conical shape slightly coiled in a corkscrew, with the nucleus partially covered by an acrosome, where an apical vesicle is located at the lateralized apex. This peculiar shape suggests the helical displacement movement of the spermatozoa. The head and the nucleus are slightly larger size compared to those of other gastropod species. The intermediate tract is surrounded by a mitochondrial complex and a glycogen helix. The glycogen helix is coiled helically along the intermediate tract, presenting at least five twists of glycogen helices. The complexity of both the mitochondrial complex and the glycogen helix suggests a high metabolic consumption considering the long period of time until fertilization occurs. Our findings on the detailed characterization of Cornu aspersum spermatozoa, obtained from a frozen hermaphroditic duct can contribute to a better understanding of the functional morphology of sperm and serve as a reference for future studies.

En este estudio describimos la morfología funcional de Cornu aspersum (Helix aspersa), espermatozoides utilizando microscopías de luz, barrido (SEM) y electrónica de transmisión (TEM). Los estudios se realizaron con espermatozoides localizados en el conducto hermafrodita congelado. Nuestros resultados mostraron que la cabeza presenta una forma cónica alargada ligeramente enrollada en un tirabuzón, con el núcleo parcialmente cubierto por un acrosoma, donde se ubica una vesícula apical en el ápice lateralizado. Esta peculiar forma sugiere el movimiento de desplazamiento helicoidal de los espermatozoides. La cabeza y el núcleo son de un tamaño ligeramente mayor en comparación con los de otras especies de gasterópodos. El tracto intermedio está rodeado por un complejo mitocondrial y una hélice de glucógeno. La hélice de glucógeno se enrolla helicoidalmente a lo largo del tracto intermedio, presentando al menos cinco giros de hélices de glucógeno. La complejidad tanto del complejo mitocondrial como de la hélice de glucógeno sugiere un alto consumo metabólico considerando el largo período de tiempo hasta que ocurre la fecundación. Nuestros hallazgos sobre la caracterización detallada de los espermatozoides de Cornu aspersum, obtenidos de un conducto hermafrodita congelado, pueden contribuir a una mejor comprensión de la morfología funcional de los espermatozoides y servir como referencia para futuros estudios.

Effects of whitening dentifrices on the enamel color, surface roughness, and morphology

The aim of this study was to evaluate the whitening and abrasion effects of dentifrices containing different whitening agents on artificially stained and unstained enamel. 160 human dental enamel discs were distributed into four groups according to the type of dentifrices applied on them (n=40): Group I, non-whitening dentifrice (control group); Group II, dentifrice containing charcoal; Group III, dentifrice containing blue covarine; Group IV, dentifrice containing hydrogen peroxide. Half of the specimens in each group were immersed in coffee solution. Color measurements were evaluated from stained and unstained specimens before and after brushing by a spectrophotometer. The surface roughness of each unstained specimen was analyzed using a profilometer after the brushing and bleaching. The surface of one randomly selected specimen from each group was observed using a scanning electron microscope (SEM). Statistical analysis of the color change was performed using the Kruskal-Wallis test. The one-way ANOVA was used to evaluate surface roughness. Group III provided significantly higher recovery on ΔE00 values than other groups on the unstained enamel (p<0.05). Group IV showed significantly the highest ΔE00 values on stained enamel (p<0.05) and also Group IV showed the highest surface roughness values (p<0.05), SEM revealed a more irregular surface in groups III and IV. It can be stated that dentifrice containing blue covarine is both an effective and a safe way to provide whiter teeth with routine home tooth brushing.

El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de blanqueamiento y abrasión de los dentífricos que contienen diferentes agentes blanqueadores en el esmalte teñido y no teñido artificialmente. Se distribuyeron 160 discos de esmalte dental humano en cuatro grupos según el tipo de dentífrico aplicado sobre ellos (n=40): Grupo I, dentífrico no blanqueador (grupo control); Grupo II, dentífrico que contiene carbón vegetal; Grupo III, dentífrico que contiene azul; Grupo IV, dentífrico que contiene peróxido de hidrógeno. La mitad de los especímenes de cada grupo se sumergieron en una solución de café. Las mediciones de color se evaluaron a partir de especímenes teñidos y no teñidos antes y después del cepillado con un espectrofotómetro. La rugosidad de la superficie de cada muestra sin teñir se analizó utilizando un perfilómetro después del cepillado y del clareamiento. La superficie de un espécimen seleccionado al azar de cada grupo se observó utilizando un microscopio electrónico de barrido (MEB). El análisis estadístico del cambio de color se realizó utilizando la prueba de Kruskal-Wallis. Se utilizó el ANOVA para evaluar la rugosidad de la superficie. El grupo III proporcionó una recuperación significativamente mayor en los valores de ΔE00 que otros grupos en el esmalte no teñido (p<0,05). El Grupo IV mostró significativamente los valores más altos de ΔE00 en el esmalte teñido (p<0.05) y también el Grupo IV mostró los valores más altos de rugosidad superficial (p<0.05), el análisis en MEB reveló una superficie más irregular en los grupos III y IV. Se puede afirmar que el dentífrico que contiene azul es una forma efectiva y segura de proporcionar dientes más claros con el cepillado de rutina en el hogar.

Clinical study of different composite resin systems in Class I cavities (an 18-month randomized clinical trial) / Estudo clínico de diferentes sistemas de resina composta em cavidades de Classe I (um ensaio clínico randomizado de 18 meses)

Objective: this double-blind randomized clinical trial evaluate the clinical performance of Thermo-Viscous Bulk Fill composite, Self-Adhesive Flowable composite, and Filtek Bulk Fill Composites restorations in Class I cavities over a period of 18 months. Material and Methods: twenty individuals between the ages of 30 and 45 participated in this research. Each patient should have at least three occlusal Class I carious lesions on their molars. They were dispersed at random, with n=20 teeth representing each tested material. Group I (Futurabond M+ and VisCalor Bulk Fill which heated in a viscolar dispenser at 68 °C for 30s and placed in a 4 mm thickness), Group II (Fusio Liquid Dentin self-adhesive composite which put in a thin layer (1mm increment)), and Group III (Single Bond Universal and Filtek Bulk Fill Posterior composite which applied in 4 mm thickness without heating). Using (USPHS) criteria, all restorations were assessed clinically at baseline, 6 months, 12 months, and 18 months. Using an inverse replica, the marginal seal of the investigated restorations was further evaluated under SEM. Statistical analysis was performed with Chi-square test for all USPH parameters. Results: the three tested groups recorded a one hundred percent retention rate after 18 months follow up period. Concerning marginal adaptation, marginal discoloration, anatomical form, surface texture, and color matching, there was a significant difference (p˂0.05) between the three tested groups after 12 & 18 months. After 12 & 18 months, SEM analysis of the marginal seal revealed a statistically significant difference between the three groups. Conclusion: Bulk fill resin composite restorations showed satisfactory acceptable clinical performance after 18 months of clinical service compared to self-adhesive flowable composites, and Viscalor Bulk Fill composite demonstrated excellent results with considerable changes in marginal integrity as a consequence of thermal viscous technology and increased adaptability of restorations toward cavity walls and margins (AU)

Objetivo: este ensaio clínico randomizado duplo-cego avaliou o desempenho clínico de restaurações de resina Bulk Fill Termo-Viscosa, resina autoadesiva Flowable e Filtek Bulk Fill Composites em cavidades Classe I durante um período de 18 meses. Material e Métodos: 20 indivíduos com idade entre 30 e 45 anos participaram da pesquisa. Cada paciente deveria ter pelo menos três lesões de cárie oclusais de Classe I nos molares. Eles foram divididos aleatoriamente, com n=20 dentes representando cada material testado. Grupo I (Futurabond M+ e VisCalor Bulk Fill aquecido em dispensador viscolar a 68 °C por 30s e colocado em uma espessura de 4 mm), Grupo II (resina composta autoadesiva Fusio Liquid Dentin colocada em uma camada fina (incremento de 1 mm)) e Grupo III (resina composta Single Bond Universal e Filtek Bulk Fill Posterior aplicado em espessura de 4 mm sem aquecimento). Usando os critérios (USPHS), todas as restaurações foram avaliadas clinicamente no início, 6 meses, 12 meses e 18 meses. Usando uma réplica inversa, o selamento marginal das restaurações investigadas foi avaliado em MEV. A análise estatística foi realizada com o teste qui-quadrado para todos os parâmetros USPH. Resultados: os três grupos testados registraram uma taxa de retenção de cem por cento após um período de acompanhamento de 18 meses. Em relação à adaptação marginal, descoloração marginal, forma anatômica, textura da superfície e combinação de cores, houve uma diferença significativa (p˂0,05) entre os três grupos testados após 12 e 18 meses. Após 12 e 18 meses, a análise SEM do selamento marginal revelou uma diferença estatisticamente significativa entre os três grupos. Conclusão: as restaurações de resina composta Bulk Fill apresentaram desempenho clínico aceitável satisfatório após 18 meses de atendimento clínico em comparação com as resinas compostas fluidas autoadesivas, e a resina composta Viscalor Bulk Fill demonstrou excelentes resultados com mudanças consideráveis na integridade marginal, como consequência da tecnologia viscosa térmica e maior adaptabilidade de restaurações nas paredes e margens da cavidade (AU)

How does radiotherapy affect the adhesion of universal adhesive to enamel and dentin? A qualitative and quantitative analysis? / Efecto de la radioterapia a la adhesión del adhesivo universal al esmalte y dentina? Un análisis cualitativo y cuantitativo?

Abstract This study investigated the shear bond strength (SBS) of a universal adhesive to enamel/dentin; 1) that had undergone radiotherapy (RT) and 2) that were readily restored and had undergone RT. Enamel and dentin surfaces were obtained from 90 intact human molars. They were randomly divided into six groups according to the presence and timing of irradiation (RT0:no radiotherapy/control, RT1:RT before restoration, RT2:RT after restoration groups) and adhesive application modes (etch&rinse/ER, self-etch/SE)(n=15). A universal adhesive and resin composites were applied. The radiotherapy protocol was conducted with 60 Gy. The SBS test was subjected (1mm/min) and failure type analysis was performed. The resin-enamel/dentin interfaces were examined. Data were statistically analyzed. For enamel and dentin, the presence and timing of irradiation did not significantly influence the SBS values (p>0.05). For enamel, significantly higher SBS values were obtained using etch&rinse mode than self-etch mode (p<0.05). The predominant failure was mixed type. Loss of enamel prisms and obliterated irregular dentinal tubules were found for the radiotherapy-treated specimens. Resin tags were clearer in the irradiated enamel treated with ER than SE. Irradiation with different timings did not influence the bond strength to enamel and dentin, negatively. Irrespective of radiotherapy, the etch&rinse mode caused higher bond strength to enamel than self-etch mode.

Resumen Este estudio investigó la fuerza de unión al cizallamiento (SBS) de un adhesivo universal al esmalte/dentina en piezas que se habían sometido a radioterapia (RT). Se obtuvieron superficies de esmalte y dentina de 90 molares humanos intactos. Se dividieron aleatoriamente en seis grupos según la presencia y el momento de la irradiación (RT0: sin radioterapia/control, RT1: RT antes de la restauración, RT2: RT después de la restauración considerando los modos de aplicación del adhesivo (n=15). Se aplicó un adhesivo universal y resinas compuestas. El protocolo de radioterapia se realizó con 60 Gy. Se sometió a la prueba adhesiva (1mm/min) y se realizó análisis del tipo de falla. Se examinaron las interfases resina-esmalte/dentina. Los datos fueron analizados estadísticamente. Para el esmalte y la dentina, la presencia y el momento de la irradiación no influyeron significativamente en los valores adhesivos (p>0,05). Para el esmalte, se obtuvieron valores adhesivos significativamente más altos utilizando el modo de grabado y enjuague que el modo de autograbado (p<0,05). La falla predominante fue de tipo mixto. Se encontró pérdida de prismas de esmalte y túbulos dentinarios irregulares obliterados en las muestras tratadas con radioterapia. La irradiación con diferentes tiempos no influyó negativamente en la fuerza de unión al esmalte ni a la dentina. Independientemente de la radioterapia, el modo de grabado ácido y enjuague provocó una mayor fuerza de adhesión al esmalte que el modo de autograbado.

Effect of cavity disinfection protocols on microtensile bond strength of universal adhesive to dentin / Efecto de los protocolos de desinfección de cavidades en la fuerza de adhesión microtensil del adhesivo universal a la dentina

Abstract The purpose of this study was to compare the effect of different disinfection protocols of dentin on bond strength of an MDP-containing universal adhesive. Twelve extracted mandibular third molars were separated horizontally at the mid-coronal of crown to get smooth and sound dentin surfaces using low-speed diamond saw. The teeth were randomly fallen into four groups: chlorhexidine (CHX), ozone, Er,Cr:YSGG laser irradiation (LASER) and no treatment (control). After cavity disinfection application, a universal adhesive (G-Premio Bond) was applied to the surface of dentin according to self-etch mode as instructed by the manufacturer. After incremental built-up of composite resin (Charisma Smart), the specimens were immersed in distilled water at 37°C for 24h. Dentin/composite beams with 1 mm² cross sectional area were produced and micro-tensile bond strength (µTBS) was applied on these beams (n=20). Failure mods were determined under a stereomicroscope at ×40. The resin penetration of samples stained with Rhodamine B fluorochrome dye was examined with a confocal laser scanning microscope. Statistical analysis was performed with SPSS-22. Test results were analyzed using One-way Anova and Tukey HSD Post-Hoc tests (p0.5). All applications of cavity disinfection procedures decreased the µTBS of the resin-dentin interface.

Resumen El propósito de este estudio fue comparar el efecto de diferentes protocolos de desinfección de la dentina sobre la fuerza de unión de un adhesivo universal que contiene MDP. Doce terceros molares mandibulares extraídos se quebraron horizontalmente en la mitad de la corona para obtener superficies de dentina lisas y sólidas utilizando una sierra de diamante de baja velocidad. Los dientes se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos: clorhexidina (CHX), ozono, irradiación con láser Er,Cr:YSGG (LASER) y ningún tratamiento (control). Después de la aplicación de la desinfección de la cavidad, se aplicó un adhesivo universal (G-Premio Bond) a la superficie de la dentina según el modo de autograbado indicado por el fabricante. Después de la obturación con resina compuesta (Charisma Smart), las muestras se sumergieron en agua destilada a 37°C durante 24h. Se produjeron porciones de dentina/resina con un área de sección transversal de 1 mm² y se aplicó una fuerza de adhesión microtensile (µTBS) (n=20). Los modos de falla se determinaron bajo un microscopio estereoscópico a ×40. La penetración de la resina de las muestras teñidas con colorante fluorocromo rodamina B se examinó con un microscopio de barrido láser confocal. El análisis estadístico se realizó con SPSS-22. Los resultados de las pruebas se analizaron utilizando las pruebas post-hoc Anova unidireccional y Tukey HSD (p0.5). Todas las aplicaciones de procedimientos de desinfección de cavidades redujeron el µTBS de la interfaz resina-dentina.

Acacia senegal inhibits diabetic nephropathy ultrastructure alteration and renal biomarkers changes in rats / Acacia senegal inhibe la alteración de la ultraestructura de la nefropatía diabética y los cambios en los biomarcadores renales en rata

SUMMARY: Diabetic nephropathy (DN) is the most common complication of diabetes. Several studies have been done in a trial to protect against this problem at the ultrastructure level. This study investigates the protective effect of oral administration of Acacia senegal (AS) against the development of DN. Sixty male albino rats were randomly divided into six groups: control, Acacia senegal control, Diabetic untreated, diabetic insulin-treated, Diabetic AS treated, and Diabetic insulin and AS combined treated groups. Plasma glucose, HbA1c, serum Albumin, creatinine, urine creatinine was measured using specific kits. Determinations of creatinine clearance and blood pressure were done. The renal tissues of both kidneys were prepared to investigate under both light (LM) and electron microscope (EM). Ultrastructure examination of renal rats tissue of diabetic untreated rats showed the destruction of the glomerular basement membrane and endothelial cells together with hemorrhage in glomerular capsules (Bowman's capsules). On the other side, both LM and EM revealed improving the endothelial cells and the other glomerular capsules structures, especially with the combined treated group, which confirmed the improvement of the biochemical investigation in the study. In conclusion, from the present study, using the oral AS together with SC insulin could be protected against the development of DN.

RESUMEN: La nefropatía diabética (ND) es la complicación más común de la diabetes. Se han realizado varios estudios de ensayo para abordar esta dificultad a nivel de ultraestructura. Este estudio investiga el efecto protector de la administración oral de Acacia senegal (AS) contra el desarrollo de la ND. Se dividieron sesenta ratas albinas machos aleatoriamente en seis grupos: control, control de Acacia senegal, diabéticos no tratados, diabéticos tratados con insulina, diabéticos tratados con AS y grupos tratados con compuesto de insulina diabética + AS. Se midieron utilizando kits específicos, glucosa plasmática, HbA1c, albúmina sérica, creatinina en sangre y en orina. Se registraron la creatinina y la presión arterial. Los tejidos renales de ambos riñones se prepararon para investigar tanto con microscopio óptico (MO) como electrónico (ME). El examen de la ultraestructura del tejido renal de ratas diabéticas no tratadas mostró la destrucción de la membrana basal glomerular y las células endoteliales junto con hemorragia en las cápsulas glomerulares (cápsulas de Bowman). Por otro lado, tanto MO como ME revelaron una mejora de las células endoteliales y las estructuras capsulares glomerulares, en el grupo tratado con el compuesto, lo que confirmó la mejora de la investigación bioquímica. En conclusión, el uso de AS oral en combinación con insulina podría proteger contra el desarrollo de ND.

Magnificación en Periodoncia

RESUMEN: Esta revisión sobre magnificación en periodoncia presenta la evidencia disponible sobre el tema. Dentro de este trabajo se incluyen: principios y prestaciones de la magnificación, ventajas y desventajas de los diferentes sistemas, características de los instrumentos de microcirugía, ergonomía, trastornos músculo esqueletales, resultados clínicos, cicatrización, percepción de los pacientes y habilidades clínicas necesarias. El objetivo del trabajo fue comprender el funcionamiento de la magnificación, comparar la microcirugía (cirugía con magnificación) vs macro cirugía (cirugía sin magnificación) en función de la ergonomía, la cicatrización y los resultados clínicos. Comparar las ventajas y desventajas de las lupas vs microscopio y conocer las habilidades necesarias para su utilización. Se realizó una búsqueda bibliográfica manual, las bases consultadas fueron: PubMed, Biblioteca Cochrane, EMBASE, Scopus, Science Direct, SciELO. La búsqueda fue sin límites temporales o de idiomas. Se incluyeron investigaciones, revisiones bibliográficas y metaanálisis, también se realizó rastreo de citas. Se recabaron un total de 251 artículos de los cuales se seleccionaron 43 para la revisión. Los artículos fueron revisados por los autores y aceptados por consenso para su discusión. En conclusión trabajar con magnificación aporta ventajas en todos los aspectos estudiados en esta revisión y en la percepción de los pacientes. Si se comparan las lupas con el microscopio, éste ultimo es mejor en cuanto a ergonomía, iluminación, posibilidades de documentación y mayor aumento. Incorporar la magnificación requiere entrenamiento, esta revisión expone los fundamentos por los cuales dicho esfuerzo se traduce en beneficios mayores.

ABSTRACT: This review on magnification in periodontics presents the available evidence on the subject, comprising principles and benefits of magnification, advantages and disadvantages of different systems, characteristics of the instruments in microsurgery, ergonomics, musculoskeletal disorders, clinical results, healing, perception of patients and necessary clinical skills. Objective: to understand the operation of magnification, to compare microsurgery (surgery with magnification) vs macro surgery (surgery without magnification) based on ergonomics, healing, and clinical results. Compare the advantages and disadvantages of loupes vs microscope and know the skills necessary to use them. Material and Method: a manual bibliographic search was carried out, the databases consulted were: PubMed, Cochrane Library, EMBASE, Scopus, Science Direct, SciELO. The search was without time or language limits. Research, literature reviews, and meta-analysis were included, and citation tracking was also done. Results: a total of 251 articles were collected, of which 43 were selected for the review. The articles were reviewed by the authors and accepted by consensus for discussion. Conclusion: working with magnification provides advantages in all the aspects studied in this review and in the perception of the patients. If the magnifying glasses are compared with the microscope, the latter is better in terms of ergonomics, lighting, documentation possibilities and higher magnification. Incorporating magnification requires training, this review expound the justification for which such effort translates into greater benefits.

Comparative analysis of trophoblasts and angiogenesis in human placental compartments / Análisis comparativo de trofoblastos y angiogénesis en compartimentos placentarios humanos

SUMMARY: Trophoblasts perform different functions depending on their location. This study aimed to obtain structural clues about the functions of villous and extravillous trophoblasts by using light and electron microscopy. Term placenta samples were obtained from 10 healthy pregnant women following cesarean sections. Frozen sections were stained with hematoxylin-eosin, semi- thin sections were stained with toluidine blue and examined with a light microscope, while thin sections were contrasted using uranyl acetate-lead citrate and evaluated under an electron microscope. Fine structural features of villous trophoblasts overlapped some villous stromal cells. In addition to the usual appearance of mature capillaries in villous stroma, we demonstrated and reported maturational stages of angiogenetic sprouts in term placenta. Extravillous trophoblasts were classified according to their location: fibrinoid, chorion, trophoblastic, column, maternal vascular endothelium, or decidua. All of these trophoblasts shared some ultrastructural features but also were distinct from each other. In decidua, it was noted that the endothelial lining of some vessels was invaded by a few endovascular trophoblasts with irregular microvilli. These cells shared some ultrastructural properties with both villous trophoblasts and stromal cells. Examination showed that angiogenesis was still present in term placentas and that trophoblasts, endothelial and stromal cells have very similar properties ultrastructurally, suggesting they represent transformational forms.

RESUMEN: Los trofoblastos dependiendo de su ubicación realizan diferentes funciones. Este estudio tuvo como objetivo obtener pistas estructurales sobre las funciones de los trofoblastos vellosos y extravellosos mediante el uso de microscopía óptica y electrónica. Se obtuvieron muestras de placenta a término de 10 mujeres embarazadas sanas después de cesáreas. Las secciones congeladas se tiñeron con hematoxilina-eosina, las secciones semidelgadas se tiñeron con azul de toluidina y se examinaron con un microscopio óptico, mientras que las secciones delgadas se contrastaron con acetato de uranilo-citrato de plomo y se evaluaron con un microscopio electrónico. Las finas características estructurales de los trofoblastos vellosos se superponen a algunas células estromales vellosas. Además de la apariencia habitual de capilares maduros en el estroma velloso, demostramos e informamos etapas de maduración de brotes angiogenéticos en la placenta a término. Los trofoblastos extravellosos se clasificaron según su localización: fibrinoide, corion, trofoblástico, columna, endotelio vascular materno o decidua. Todos estos trofoblastos compartían algunas características ultraestructurales, pero también eran distintos entre sí. En decidua se observó que el revestimiento endotelial de algunos vasos estaba invadido por unos pocos trofoblastos endovasculares con microvellosidades irregulares. Estas células compartían algunas propiedades ultraestructurales tanto con los trofoblastos vellosos como con las células del estroma. El examen mostró que la angiogénesis todavía estaba presente en las placentas a término y que los trofoblastos, las células endoteliales y estromales tienen propiedades ultraestructurales muy similares, lo que sugiere que representan formas de transformación.

Gamma-amino butyric acid immunoreactivity in the testis tissue of Wistar and genetic absence epilepsy rats / Inmunorreactividad del ácido gamma-amino butírico en el tejido testicular de ratas Wistar con epilepsia de ausencia genética

SUMMARY: Studies have shown the adverse effects of epileptic seizures on reproductive health. The aim of the present study was to investigate morphological changes, apoptosis and GABA localization in the testis tissue of genetic absence epilepsy rats. Testis tissues of GAERS and Wistar rats were processed for paraffin embedding and electron microscopy. Sections were stained with hematoxylin and eosin, Masson's trichrome and periodic acid-Schiff reaction. GABA immunohistochemistry was applied for determining the alterations in GABA levels. GABA immunoreactivity was observed in the seminiferous tubules and interstitial areas of both GAERS and Wistar rats. GABA immunoreactivity was found to be decreased in GAERS compared to Wistar group. Electron microscopic observations showed that GABA was present in manchette microtubules, sperm tail and neck at different phases of spermiogenesis. Qualitative observations revealed that testis tissues of GAERS showed reduced sperm in the seminiferous tubules compared to the Wistar controls. In conclusion, we demonstrated GABAergic system in the seminiferous tubules of control and GAERS rats, in parallel with the previous studies; and there were alterations in this system in GAERS. We suggest that these alterations in absence epilepsy may also affect the gonadal system, resulting in decreased sperm production.

RESUMEN: Los estudios han demostrado los efectos adversos de las convulsiones epilépticas sobre la salud reproductiva. El objetivo del presente estudio fue investigar los cambios morfológicos, la apoptosis y la localización de GABA en el tejido testicular de ratas con epilepsia de ausencia genética. Se procesaron tejidos testiculares de ratas GAERS y Wistar para inclusión en parafina y microscopía electrónica. Las secciones se tiñeron con hematoxilina y eosina, tricrómico de Masson y reacción de ácido peryódico de Schiff. Se aplicó inmunohistoquímica de GABA para determinar las alteraciones en los niveles de GABA. Se observó inmunorreactividad de GABA en los túbulos seminíferos y las áreas intersticiales de las ratas GAERS y Wistar. Se encontró que la inmunorreactividad de GABA estaba disminuida en GAERS en comparación con el grupo Wistar. Las observaciones microscópicas electrónicas mostraron que GABA estaba presente en los microtúbulos, la cola y el cuello del espermatozoide en diferentes fases de la espermiogénesis. Las observaciones cualitativas revelaron que los tejidos testiculares de GAERS mostraron una reducción de los espermatozoides en los túbulos seminíferos en comparación con los controles Wistar. En conclusión, demostramos el sistema GABAérgico en los túbulos seminíferos de ratas control y GAERS, en paralelo con estudios previos; y además se observaron alteraciones en este sistema en GAERS. Sugerimos que estas alteraciones en epilepisa de ausencia genética también pueden afectar el sistema gonadal, resultando en una disminución de la producción de semen.

Prevalencia de malaria y utilidad de las pruebas de diagnóstico rápido en Playa Colorada. Una investigación de CUMIS UCV

La malaria es una de las enfermedades metaxénicas más importantes en la actualidad y en Venezuela, constituye la mayor epidemia del siglo XXI en la región de las Américas. Este trabajo tiene como objetivo determinar la prevalencia de casos de malaria en Playa Colorada, Estado Sucre, diagnosticados durante la jornada de trabajo de Campamento Universitario Multidisciplinario de Investigación y Servicio de la Universidad Central de Venezuela (CUMIS UCV) y comparar la utilidad diagnóstica de la prueba rápida SD Bioline Malaria Ag P.f/P.f/P.v. Estudio epidemiológico, observacional, descriptivo, de corte transversal y correlacional, realizado en 29 pacientes, entre el 22 y 24 de junio del año 2019. Se obtuvo una prevalencia de 1,05 % con respecto a los pacientes totales de la jornada, lo cual representa un 31 % de casos confirmados de malaria en los pacientes incluidos en el estudio. Las pruebas rápidas para malaria sólo reportaron un falso positivo y ningún falso negativo con respecto a la gota gruesa y extendido. A pesar de que el Estado Sucre constituye uno de los principales contribuyentes de casos de malaria en el país, la prevalencia reportada en este estudio fue baja, posiblemente debido a múltiples factores como las infecciones asintomáticas y submicroscópicas en zonas endémicas. Se recomienda el despistaje de pacientes asintomáticos y la utilización de métodos de diagnóstico molecular al momento de planificar estrategias de control de infecciones

Malaria is one of the most important metaxenic diseases today and in Venezuela, it constitutes the largest epidemic of the 21st century in the region of the Americas. The objective of this work is to determine the prevalence of malaria cases in Playa Colorada, Sucre state, diagnosed during the Multidisciplinary University Camp for Research and Service of the Central University of Venezuela (CUMIS UCV) field trip and to compare the diagnostic utility of the SD Bioline Malaria Ag P.f/P.f/P.v rapid test. Epidemiological, observational, descriptive, cross-sectional and correlational study, carried out in 29 patients, between June 22 and 24, 2019. A prevalence of 1.05 % was obtained with respect to total day patients, which represents 31 % of confirmed cases of malaria in the patients included in the study. Rapid tests for malaria reported only one false positive and no false negatives for the thick and thin blood smear. Despite the fact that Sucre state constitutes one of the main contributors of malaria cases in the country, the prevalence reported in this study was low, possibly due to multiple factors such as asymptomatic and submicroscopic infections in endemic areas. Screening of asymptomatic patients and the use of molecular diagnostic methods is recommended when planning infection control strategies

Magnificación en la terapia endodóncica mediante el microscopio operatorio / Magnification in endodontic therapy through the operatory microscope

La microendodoncia involucra la visualización a través de un microscopio operatorio de todas las fases del tratamiento de conductos y procedimientos de cirugía apical y correctiva por parte del endodoncista. Existe sobrada evidencia acerca de las mejoras que puede aportar la magnificación al tratamiento; la literatura demuestra que la capacidad del operador mejora si su visión del campo gana claridad y precisión, ambos recursos pueden ser proporcionados por el microscopio operatorio, aunado a que posibilita diagnósticos más certeros junto con mejoras en el pronóstico, lo que permite evitar posibles complicaciones. La calidad de los tratamientos endodóncicos involucra infinidad de factores, cada uno relevante en sí mismo pero, en determinados casos, el microscopio puede significar la diferencia entre un tratamiento exitoso o un fracaso clínico. En la actualidad, se ha convertido en un tema de lo más relevante, por lo que el objetivo del presente trabajo es revisar la literatura con el fin de ayudar al entendimiento basado en evidencia científica de los criterios que determinan la relevancia del uso del microscopio en el ámbito endodóncico (AU)

Microendodontics involves the visualization through an operating microscope of all phases of root canal treatment and apical and corrective surgery procedures by the endodontist. There is plenty of evidence about the improvements that magnification can provide, the literature shows that the operator's ability improves if his vision of the field gains clarity and precision, both resources can be provided by the operating microscope, added to the fact that it enables more accurate diagnoses together with improvements in the prognosis allowing to avoid possible complications. The quality of endodontic treatments involves countless factors, each relevant in itself, but in certain cases the microscope can mean the difference between a successful treatment or a clinical failure. At present, it has become a very relevant topic, so the objective of this work is to review the literature in order to help understand the criteria that determine the relevance of the use of the microscope in the endodontic field based on scientific evidence (AU)

Evaluación comparativa de las características de porosidad entre el cemento Portland, MTA y Biodentine con microscopio electrónico de barrido / Comparison of the porosity characteristics of Portland cement, mineral trioxIde aggregate and Biodentine by scanning electron microscopy

Objetivo: El propósito del presente estudio fue evaluar comparativamente las características de porosidad entre el cemento Portland, MTA Angelus® y Biodentine Septodont®, observados con un microscopio electrónico de barrido. Materiales y métodos: Se prepararon los cementos según las indicaciones del fabricante y se empaquetaron en tubos cilíndricos de polietileno con un diámetro interno de 10 mm y una altura de 5 mm. Se analizó la porosidad de las muestras mediante el microscopio electrónico de barrido. El análisis estadístico se realizó utilizando la prueba Kruskal-Wallis. El nivel de significancia se estableció en 0,05 Resultados: Se observó la descripción de la media de los valores del diámetro de los poros, y el tamaño mayor correspondió al cemento Portland (11,07). Existen diferencias significativas entre las medias del diámetro de los poros con un p = 0,05. Se identificó que el MTA Angelus® tiene la mayor cantidad de poros, le sigue el Biodentine Septodont® y, por último, el Portland. Se comparó la cantidad de poros entre los tres cementos y no se encontraron diferencias significativas, con un p = 0,09. Conclusión: Los análisis realizados en los cementos endodónticos dieron como resultado que el cemento Portland tiene mayor diámetro de poro a diferencia de los otros dos, lo cual implica que tanto el Biodentine Septodont® como el MTA Angelus® tienen mejores propiedades de resistencia y permeabilidad para evitar la microfiltración, y por tanto son mejores para la solución de casos clínicos. (AU)

Objective: The purpose of this study was to compare the porosity characteristics of Portland cement, mineral trioxide aggregate (MTA) Angelus® and Biodentine Septodont® by scanning electron microscopy. Materials and Methods: Cements were prepared according to the manufacturer's instructions and packed in cylindrical polyethylene tubes with an internal diameter of 10 mm and a height of 5 mm. The porosity of the samples was analyzed using scanning electron microscopy. Statistical analyses were performed using the Kruskall Wallis test. The level of significance was established at 0.05. Results: The largest size mean diameter valus was found with Portland cement (11.07). There were significant differences between the mean pore diameters (p = 0.05). MTA Angelus® had the largest number of pores, followed by Biodentine Septodont®, and finally, Portland. There were no significant differences in the pores of the three cements (p = 0.09). Conclusion: The results of this comparative analysis of endodontic cements showed that Portland cement has a larger pore diameter than MTA Angelus® and Biodentine Septodont®, demonstrating that these latter two cements present better resistance and permeability properties, and thereby prevent microleakage. (AU)

Ultrastructural clarification of the peripherally located actin network in the myelinated axons / Aclaración ultraestructural de la red de actina localizada periféricamente en los axones mielinizados

SUMMARY: Despite the existence of a large amount of actin in the axons, the concentration F-actin was quite low in the myelinated axons and almost all the F-actin were located in the peripheries of the myelinated axons. Until now, the ultrastructural localization of F-actin has still not been reported in the myelinated axons, probably due to the lack of an appropriate detection method. In the present study, a phalloidin-based FITC-anti-FITC technique was adopted to investigate the subcellular localization of F-actin in the myelinated axons. By using this technique, F-actin is located in the outer and inner collars of myelinated cytoplasm surrounding the intermodal axon, the Schmidt-Lanterman incisures, the paranodal terminal loops and the nodal microvilli. In addition, the satellite cell envelope, which encapsulates the axonal initial segment of the peripheral sensory neuron, was also demonstrated as an F-actin-enriched structure. This study provided a hitherto unreported ultrastructural view of the F-actin in the myelinated axons, which may assist in understanding the unique organization of axonal actin cytoskeleton.

RESUMEN: A pesar de la existencia de una gran cantidad de actina en los axones, la concentración de F-actina era bastante baja en los axones mielinizados y casi la totalidad de F-actina se localizaba en las periferias de los axones mielinizados. A la fecha aún no se ha reportado la localización ultraestructural de F-actina en los axones mielinizados, probablemente debido a la falta de un método de detección apropiado. En el presente estudio, se adoptó una técnica FITC-anti-FITC basada en faloidina para investigar la localización subcelular de F-actina en los axones mielinizados. Mediante el uso de esta técnica, la F-actina se localiza en los collares externo e interno del citoplasma mielinizado que rodea el axón intermodal, a las incisiones de Schmidt-Lanterman,a las asas terminales paranodales y a las microvellosidades nodales. Además, la envoltura de la célula satélite, que encapsula el segmento axonal inicial de la neurona sensorial periférica, también se demostró como una estructura enriquecida con F-actina. Este estudio proporcionó una vista ultraestructural de la F-actina en los axones mielinizados, que puede ayudar a comprender la organización única del citoesqueleto de actina axonal.

The modified method of luxol fast blue for paraffin-embedded myelin sheath staining / El método modificado de luxol fast blue para la tinción de mielina fijada en parafina

SUMMARY: Histological techniques are the study of animal and human tissues through staining and examining them under a microscope. To demonstrate the axonal degeneration and demyelination in histological studies, the Luxol Fast Blue staining is gold standard techniques. In this study, a new histochemical method based on modified Luxol Fast Blue for the staining of the myelin sheath in sciatic nerve tissues described. The sciatic nerves of rats were removed and then the sciatic nerve was immersed in 10 % formaldehyde for one week and embedded in paraffin block. Next, thin sections (5 µm) were cut, using a microtome and stained with conventional and modified Luxol Fast Blue. Our results showed that a new method of modified Luxol Fast Blue staining can accurately identify the myelin in the sciatic nerve fibers. The current study showed that the Luxol Fast Blue combination with Light Green has a good effect on myelin coloration, and the results of this study are comparable to LFB combination with Sirius red.

RESUMEN: Las técnicas histológicas son el estudio de tejidos animales y humanos mediante tinción y examen bajo un microscopio. Para demostrar la degeneración axonal y la desmielinización en estudios histológicos, la tinción Luxol Fast Blue es una técnica estándar de oro. En este estudio, se describe un nuevo método histoquímico basado en Luxol Fast Blue modificado para la tinción de mielina en los tejidos del nervio ciático. Se seccionaron los nervios ciáticos de ratas y luego el nervio ciático se sumergió en formaldehído al 10 % durante una semana y se fijó en bloque de parafina. Posteriormente, se cortaron secciones delgadas (5 µm) usando un microtomo y se tiñeron con Luxol Fast Blue convencional y modificado. Nuestros resultados mostraron que un nuevo método de tinción Luxol Fast Blue modificado puede identificar con precisión la mielina en las fibras del nervio ciático. El estudio actual mostró que la combinación Luxol Fast Blue con Light Green es un buen efecto sobre la coloración de mielina, y los resultados de este estudio son comparables a la combinación LFB con Sirius red.

¡Estudiando el Desarrollo Embrionario y Fetal con el Microscopio Virtual! En Tiempos de Covid-19 / Studying Embryonic and Fetal Development with the Virtual Microscope! In the Times of Covid-19

RESUMEN: La Microscopía Virtual es una herramienta tecnológica que permite la visualización de imágenes digitales microscópicas de gran resolución a través de un computador imitando la funcionalidad de un microscopio óptico tradicional. El presente trabajo presenta nuestra experiencia en el uso de esta modalidad de trabajo, útil hoy en día, en medio de la pandemia por Covid-19.

SUMMARY: Virtual Microscopy is a technological tool that allows the visualization of high resolution microscopic digital images through a computer, imitating the functionality of a traditional light microscope. The present work presents our experience in the use of this working modality, useful today, in the midst of the Covid-19 pandemic.

Anatomical and ultrastructural sex differences in mean diameter and thickness of myelinated axons in adult rat corpus callosum / Diferencias sexuales anatómicas y ultraestructurales del diámetro medio y grosor de los axones mielinizados en el cuerpo calloso de ratas adultas

Sexual dimorphism exists at all levels of the nervous system. These sex differences could underlie genderrelated differences in behavior and neuropsychological function, as well as the gender differences in the prevalence of various mental disorders such as autism, attention deficit disorders, and schizophrenia. Myelination, on the other hand, is a unique cellular process that can have a dramatic impact on the structure and physiology of an axon and its surrounding tissue. The corpus callosum (CC) is the largest of the brain commissures, which connects the cerebral cortices of the two hemispheres, and provides interhemispheric connectivity for information transfer and processing between cortical regions. Variation in the axonal properties of CC will alter the interhemispheric connectivity. The CC consists of myelinated and unmyelinated axons, glial cells and blood vessels. Several functional studies have reported that the function of CC is associated with its axons density and myelination properties. The sexual dimorphism in the axonal content of the CC has always been controversial; hence, the aim of this study was to analyze the differences in axons' diameter and myelin sheath thickness of the CC between male and female rats. For this purpose, five pairs of adult male and female rats were perfused and the CC were removed and sectioned. Four sections from different subregions of the corpus callosum that represent the genu, anterior body, posterior body, and splenium of the CC were stained and electron microscopic images were captured using stereological guidelines. Later, the axons diameter and myelin sheath thickness for each subregion were calculated and compared between males and females. Our preliminary findings of the present study indicated region specific differences in the myelinated axon thickness and diameter in the CC between male and female rats.

El dimorfismo sexual existe en todos los niveles del sistema nervioso. Estas diferencias de sexo podrían ser la base de las diferencias de comportamiento y función neuropsicológica relacionadas con el sexo, así como las diferencias en la prevalencia de diversos trastornos mentales, como el autismo, los trastornos por déficit de atención y la esquizofrenia. La mielinización, por otro lado, es un proceso celular único que puede tener un impacto dramático en la estructura y fisiología de un axón y su tejido circundante. El cuerpo calloso (CC) es la mayor comisura cerebral, que conecta las cortezas cerebrales de ambos hemisferios, y proporciona la conectividad interhemisférica para la transferencia y el procesamiento de información entre regiones corticales. La variación en las propiedades axonales de CC alterará la conectividad interhemisférica. El CC consiste en axones mielinizados y no mielinizados, células gliales y vasos sanguíneos. Varios estudios funcionales han informado que la función de CC está asociada con la densidad de axones y las propiedades de mielinización. El dimorfismo sexual en el contenido axonal del CC siempre ha sido controvertido; por lo tanto, el objetivo de este estudio fue analizar las diferencias en el diámetro de los axones y el grosor de la vaina de mielina del CC entre ratas macho y hembra. Para este propósito, se perfundieron cinco pares de ratas macho y hembra adultas y se extrajeron y seccionaron las CC. Se tiñeron cuatro secciones de diferentes subregiones del cuerpo calloso que representan el genu, el cuerpo anterior, el cuerpo posterior y el esplenio y se capturaron imágenes de microscopía electrónicas utilizando referencias estereológicas. Posteriormente se calculó el diámetro de los axones y el grosor de la vaina de mielina para cada subregión y se compararon entre machos y hembras. Nuestros hallazgos preliminares del presente estudio indicaron diferencias específicas en el grosor y diámetro del axón mielinizado en el CC entre ratas macho y hembra.

Brain structure morphology after being fixated with ethanol on electron microscope / Morfología de la estructura cerebral después de la fijación con etanol en microscopio electrónico

Fixation is one of the processes in preparing histology and pathology. The common material for fixation is buffered formalin including paraformaldehyde. However, the effect of the damaged cells, which is fixed for a long time, causes the research for other fixation materials to become necessary. In addition, paraformaldehyde is also harmful to human body and natural environment. Ethanol is one of the alternative fixation materials, which has been used for two hundred years. It has been used for many purposes, both in routine staining and immunohistochemistry. Nonetheless, no research confirms its effect on the electron microscope. The authors studied the effect of 50 % of ethanol on the cell membrane, organelles, and nucleus of Purkinje cells (Neuron purkinjense) observed on a light microscope and Transmitted Electron Microscope (TEM). Then it was compared to buffered formalin. In the light microscope, it shows that both of fixations have no different effects of the morphology of the cell membrane, cytoplasm, the nucleus of Purkinje cells and the neutrophils. We assume that our 50 % of ethanol concentration is almost the same as BF 10 % in the ability of hardening tissue and color absorption based on the previous study. In TEM, the structure of the cell membrane, organelles, and cytoplasm of Purkinje cell look broken in the cerebellum of 50 % of ethanol except for the nucleus. There was no significant difference diameter of the nucleus. It happened in general because of the shrinkage effect of ethanol. However, the authors recommend using 50 % of ethanol for routine staining.

La fijación es uno de los procesos en la preparación de muestras para histología y patología. El material más común para la fijación es la formalina tamponada. Sin embargo, el daño a las células que se mantienen en formalina durante mucho tiempo, hace necesario buscar otros materiales de fijación. Además, el paraformaldehido también es perjudicial para el cuerpo humano y el medio ambiente natural. El etanol es uno de los materiales de fijación alternativos que se ha utilizado durante muchos años, con diversos objetivos, tanto en la tinción de rutina como en la inmunohistoquímica. Sin embargo no se ha confirmdo su efecto con microscopio electrónico. Los autores estudiaron el efecto del 50 % de etanol sobre la membrana celular, los orgánulos y el núcleo de las células de Purkinje observados en un microscopio óptico y un microscopio de transmisión electrónico (TEM). Luego se comparó con la formalina tamponada. En el microscopio óptico se observó que ambas fijaciones no tienen efectos diferentes a la morfología de la membrana celular, el citoplasma, el núcleo de las células de Purkinje y los neutrófilos. Suponemos que nuestra concentración de 50 % de etanol es casi la misma que BF 10 % en la capacidad de endurecer el tejido y la absorción de color según el estudio anterior. En TEM, la estructura de la membrana celular, los orgánulos y el citoplasma de la célula de Purkinje presentaban daño en el cerebelo con un 50 % de etanol, a excepción del núcleo. No hubo diferencia significativa en el diámetro del núcleo. En general lo anterior se debió al efecto de contracción del etanol. En conclusión los autores recomiendan usar 50% de etanol para la tinción de rutina.